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接种的绵羊中,有几头体温升高,其中一头体温升到40℃,另有一头有轻度
水肿,这一组试验的绵羊除一头外,食欲正常。全部试验结束时未经免疫的
绵羊死了22头。有2头正在咽气,还有一头表现出典型炭疽病的症状;免疫
过的一组绵羊全都健康,没有发病。罗西尼奥检验了2头死的绵羊,显微镜
下看到血液中含有大量的炭疽杆菌。免疫过的奶牛没有异常表现,未免疫的
奶牛表现出严重的水肿。
普伊一福特农场的公开试验引起了极大的轰动。巴斯德向法国科学院报
告了试验的结果。一年之内,厄尔卢瓦地区给8万只羊注射了疫苗。与同一
时期相比,羊的死亡率从9%下降到0。65%;牛的死亡率从7%下降到0。24
%。1882年底,炭疽杆菌疫苗在德国开始应用。到了1894年,疫苗已免疫
了340万头羊和43。8万头牛,总有效率在99%,死亡率为0。3%—1%。
九、预防鸡霍乱和猪霍乱
1878年,在巴斯德思考如何使牲畜不感染炭疽病的时候,有人请巴斯德
去研究一种鸡病——鸡霍乱。患病的鸡不吃食,整天无精打采,耷拉下脑袋
和翅膀,眼睛闭着,拉稀,混身出血,没两天就死了。
巴斯德对死于鸡霍乱的鸡血进行研究。他通过连续性分离血中的微生
物,得到了纯的菌种。这种微生物的形状象个“8”字。这种微生物在鸡汤培
养基中的繁殖能力是惊人的,与弧菌完全不同。这种微生物的毒力很大,在
面包屑上滴上很小的一滴,就可以使一只鸡死去。鸡吃了带菌食物,经过肠
道感染上鸡霍乱。所以鸡的肠道是这种微生物良好的培养基。病鸡的粪便成
了传染的病源。现在我们知道了巴斯德发现的这种微生物是败血巴斯德杆
菌。
巴斯德把引起鸡霍乱的微生物找到了,他就把它培养起来,让它繁殖;
然后把它注射到正常的鸡身上,看它会不会也引起鸡霍乱;如果鸡得了病,
还会在这只鸡的身体内,找到同样的微生物。
巴斯德和他的助手把病鸡的一滴血放在肉汤里。再把它放在暖箱里去培
养;第二天的同一时间,取出一滴培养液,放到另一瓶新鲜培养液里,再放
在暖箱中继续培养。与此同时他们每天用新鲜培养液给鸡接种,成功地诱发
了鸡霍乱,观察鸡霍乱病的情况。
这年夏天,巴斯德正在紧张研究鸡霍乱的时候,接到家里的来信,信中
说他的女儿已经订婚,就要结婚了。巴斯德心中十分高兴,决定回去给女儿
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办婚事。他向助手鲁和尚贝朗交代了工作以后,就回家去了。
两位助手按照巴斯德吩咐,天天接种一次新培养液,给鸡注射一次,记
录鸡的患病情况。有一天,两位助手决定去度假。他们把一瓶鸡霍乱的肉汤
培养液放在碗柜里,锁上实验室的门就去了。过了些日子,巴斯德和助手们
都回来了。尚贝朗取出碗柜里的鸡霍乱培养液给一只鸡注射了。第二天,意
外的事情出现了,这只鸡竟然没有发病,仍然活蹦乱跳地活着。
两位助手商量了这件事:看来那瓶培养液过期了,我们还是到鸡场去要
一只病鸡,重新培养新鲜的鸡霍乱菌吧。这件事可不能让巴斯德老师知道。
他们知道巴斯德老师严格认真,一丝不苟,这件事要是让老师知道了,非吃
一顿批评不可。他们决定“保密”。
他们制成了新鲜鸡霍乱菌的培养液。第二天,他们用新制的培养液,给
一些鸡注射了。惊人的事情发生了。所有的鸡都象往常一样,得病死亡,只
有一只例外!经过仔细核对,正是那只注射过“无效”的过期培养液的鸡。
“这是怎么回事呢?”巴斯德问助手。两位助手低下了头。尚贝朗把事
情的经过如实地说了出来,请求老师处罚他们。巴斯德没说什么,低头沉思。
他没有责备两位助手。突然,巴斯德跳了起来,喊道:“我明白了,那只鸡
有抵抗力,所以它没有死。把这瓶培养液留下来,不能倒掉!”
巴斯德仔细地思考着过期的鸡霍乱菌为什么会使鸡有免疫力——也就是
不得病,有抵抗力。他又从患有鸡霍乱的病鸡血中重新分离,培养出病原菌,
并买来一批鸡做试验。鉴于上次试验的结果,他把未感染病的和新买的鸡分
成四组。新鸡和老鸡两组都注射新制成的的培养液,另两组分别注射保存的
培养液和新制成的培养液。试验的结果是:注射过保存培养液的鸡群,抵抗
住了新制的培养液中病原菌的攻击;与此相反的试验组,鸡都患病死了。
这次试验结果同假期归来后试验结果为什么不同呢?巴斯德想,除去培
养液放置时间长外,也许还有别的什么原因。经过反复试验和验证,巴斯德
发现,如果让培养液长期暴露在空气中,鸡霍乱菌就会失去致病的能力,其
毒力减弱了。用减毒病原菌注射后的鸡,产生了对强毒病原菌抵抗的能力。
巴斯德继续研究引起病原菌毒力减弱的原因。他发现这与两次传代培养
间隔时间长短有关,间隔的时间越长,减毒程度就越大。他刊登在《医学科
学院学报》上第一篇探讨鸡霍乱病文章说,鸡霍乱也能以毒力减弱的状态存
在,它能诱发病症,但不造成死亡,用减毒病原菌注射的动物复原后,即使
用强毒的病原菌接种,也能存活下来。巴斯德把减毒的鸡霍乱菌株称为“疫
苗”,这个名词一直沿用到今天。
从这里开始,巴斯德又重新来研究炭疽杆菌。他用同样的方法,想制出
炭疽杆菌的疫苗,给牛、羊、马预防炭疽病。可是他失败了。他仔细的思考
着:为什么对鸡霍乱菌有效的办法对炭疽杆菌却无效呢?除去时间的长短、
与空气接触不接触外,与温度是不是也有关呢?
巴斯德把培养箱的温度提高到45℃,炭疽杆菌就变成芽孢。这时候,它
的抵抗力极高,在滚开的水里煮它,它还能活十分钟;如果干热烧到100℃
还能活一小时;而放在干燥地方,竟能活许多年,使牛、羊得炭疽病。可是,
如果把温度调整到42—43℃之间,它就不会产生芽孢,而且危害牛羊的作用
也变小了,可以做为疫苗给牛、羊接种防病。他这样做了多次试验,证明能
预防炭疽病。
在完成炭疽病的研究之后,巴斯德又开始研究另一种给畜牧业带来巨大
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损失的牲畜疾病猪丹毒,就是猪霍乱。
巴斯德的助手L·蒂利埃于1882年在维埃纳省从病猪体内分离出一种微
生物。为了证明这种微生物与猪霍乱之间的关系,并寻求治疗的办法,巴斯
德和他的助手于9月到达博莱纳,进行研究试验。
11月,巴斯德在给法国科学院的报告中写到:猪丹毒,即猪霍乱,病原
菌是一种象“8”的微生物,很容易在体外培养。这种微生物可使兔子和绵羊
患病和死亡,但不能感染鸡。所以它与鸡霍乱的病原菌不同。用少量病原菌
的菌液感染猪,可迅速发病和死亡。用减毒病菌能很快制成新的疫苗。
巴斯德用兔子传代猪霍乱病原菌,几代后便得到了无致病作用的疫苗。
在1886——1892年,用这种疫苗接种了10万多头猪。
巴斯德抓住一件偶然的事件,认真思考,敏锐观察,周密试验,终于取
得了战胜传染病的划时代成就——创立了免疫学!
1882年,巴斯德被选为法国研究院院士,被选为研究院院士是学者的最
高荣誉。
1883年,法国内阁提议,作为国家褒奖,把1874年巴斯德1。2万法郎
年薪,增加到2。5万法郎,还成立了一个委员会,对巴斯德的贡献作出评价。
评价报告的起草人贝尔写道:“巴斯德的贡献主要是3项伟大的发现:第一,
每种发酵都是由一种特殊微生物生命活动的结果。第二,各种传染病都是由
一种特殊微生物,在生物体内生命活动的结果。第三,把一种传染病的微生
物在某种不利于生长条件下培养,就可以减弱其致病力,把病原菌变成了预
防疫苗。”
运用第一项发现,巴斯德为生产酒和醋制定了原则,防止了在保存过程
中的次级发酵、产物的变酸或进一步氧化。第二项发现的成果是,保护了牛、
羊免受炭疽杆菌的感染,使蚕免受微粒子病的传染。在这一原则的指导下,
外科医生控制了化脓感染。第三项发现的成果是,用人工减毒的办法制造出
鸡霍乱、炭疽病和猪霍乱的减毒疫苗。
评价报告中表示希望不久的将来,狂犬病也将得到征服。
十、战胜狂犬病
巴斯德从小就对狂犬病的印象十分深刻,他永远也忘不了小时候在阿尔
布瓦街上所听到被疯狗咬伤的病人,当被烧红的烙铁烧烙伤口时发出凄惨的
叫喊声。这促使他对当时流行的狂犬病进行了研究。
狂犬病是由狂犬咬伤而传染。人被疯狗咬伤以后,经过一段时间,就发
病了。病人先是发烧头痛;然后怕风,尤其怕强的光线或者大的声音;病人
对水非常恐惧,随后四肢抽搐,头部和背部向后仰,牙关紧闭,抽风不止,
十分痛苦。最后,病人总是死亡。狂犬病对人,对狗都是可怕的疾病。
巴斯德决定研究狂犬病的时候,他已经是60多岁的老人了,头发斑白,
行动不便。他的朋友们为他担忧,一位朋友说:“巴斯德不知道科学的限界,
科学能解决的问题毕竟是有限的,我怕他徒劳无功。”但也有人认为:“就
巴斯德以往的辉煌成就来看,他或许也能防止狂犬病。”忧虑与希望并存。
巴斯德知道自己选择了一道艰难的课题,但他具有炽热的研究热情和坚强的
信念,他决定继续他的研究。
按照惯例,研究传染病,首先要找到致病的微生物,为了找到这种微生
物,巴斯德甚至冒着生命危害,从狂犬的口中取出唾液,来进行试验。
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1880年12月,一个五岁的小孩一个月前被疯狗咬伤,痛苦地死在医院
里。巴斯德收集了小孩的唾液,将它与水混合接种兔子,不到36小时,兔子
就死了。把兔子的唾液再接种另一只兔子,这只兔也很快地死了。用显微镜
检查死兔的血液,发现了一种微生物,用牛肉汁培养这种微生物,将菌液再
次注射兔子和狗,毒力再度表现出来。检查这些动物的血液,看到了与培养
物相同的微生物。
狂犬病的潜伏期通常是很长的。而从唾液中分离的病原菌致死作用很
快。这引起了巴斯德对这种病原菌的怀疑,他猜想可能有一种微生物与狂犬
病毒同时存在于唾液中,随着观察的病例越多,对这一假设就确信无疑了。
狂犬病的病原菌能侵入人和狗的脑部和脊髓。所以巴斯德用尽过去的各
种方法培养病原微生物,分离不到病原菌。经过试验、研究,巴斯德肯定狂
犬病是致病因子引起的,特别是在脑和脊髓中发病是这样的。如果用动物的
脑作为培养基,也许会得到病原菌。
巴斯德的助手鲁设计了一种方法。将狗麻醉后,用环锯术打开狗的脑壳,
接种一点疯狗的脑汁。经过两个星期,狗表现出狂犬病的症状并死去。这种
方法被证明比用唾液接种更为准确。用脑接种法接种兔子和豚鼠,也都表现
出狂犬病的症状。经过反复试验,巴斯德弄清了发病部位和病原的主要线索。
试验表明,狂犬病的病原微生物很小,它的离体培养不同于一般病原微生物。
后来科技进一步发展,知道狂犬病的病原是病毒。
巴斯德用环锯术接种兔子,兔子瘫痪了。用瘫痪兔子的脑接种狗的脑部,
狗虽然表现出轻度的症状,但不久又复原了。几个星期后,用毒力强的脑再
次接种这些狗。如此反复多次在200多次试验中,发现有几只狗没有发病。
于是,巴斯德便开始研究狂犬病病原的减毒试验。
像以前用兔子连续传代接种,以得到减毒的疫苗一样,得到23只狗能抵
抗狂犬�